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Rhodamine 123染色液可用于细胞凋亡检测，Rhodamine 123是一种细胞通透性的、阳离子的荧光探针，容易被有活性的线粒体摄取，没有细胞毒性，Rhodamine 123由于带阳离子所以当线粒体膜电位存在的时候就会透过细胞膜在活细胞的线粒体内聚集，发出黄绿色荧光，而当膜电位下降的时候，聚集的Rhodamine 123就减少，从而发光强度降低。

Rhodamine 123常与Cy5和AMCA等组合进行多色荧光分析，相互间无颜色交叉；分析细胞凋亡时，可用Rhodamine 123来检测线粒体的膜电位，而用NAO来检测线粒体结构的完整性。

Rhodamine 123可用于对许多种细胞进行染色，包括植物细胞和细菌。由于细胞内ATP的量与Rhodamine 123的荧光强度之间有相关性，Rhodamine 123也可应用于检测细胞内的ATP。

• 本制品短期2周内可以2～8℃保存。染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
  
• Rhodamine 123染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
  
• 可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
  
• 有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期，试剂拆封后请尽快使用完。

• 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
  
• 细胞处理需要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。
  
• 始终保持平衡染液中pH值的一致性，因为pH值的变化将影响膜电位。
  
• 与染料达到平衡的细胞悬液中如果含有蛋白，他们将与部分染料结合，降低染料的浓度，引起假去极化。
  
• 本染色液可用于培养细胞、细胞涂片。
  
• 根据样本情况和下游的检测仪器选择合适的染色方法，只要在染色时染色工作液能充分覆盖细胞样本即可。

• 染色工作液的配制：根据样本数量，用37℃培养箱预热的培养基或HBSS缓冲液将Rho123染料100～1000倍稀释，配制成染色工作液。
  
  • 开始实验前，使用HBSS缓冲液或无血清培养基稀释染料储存液到需要的工作浓度。工作浓度应根据不同细胞的预实验结果确定的最佳工作浓度，建议至少在超过10倍范围的浓度下进行测试。一般染色终浓度100～1000倍稀释，200～500倍适合大多数细胞样本。
    
  • 建议收到产品后，根据单次使用量，对母液进行小量分装，每次使用一管，试剂-20℃避光冻存，一年稳定。
    
  • 工作液现配现用。
    
  • 为了降低探针加载过度可能引起的假阳性，建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。
• 细胞染色：收集培养细胞，用PBS洗涤2次，将细胞沉淀重悬于200μL～500μL的染色工作液中。
  
  • 也可以进行原位染色。将染色工作液添加到相应的细胞培养器皿进行染色。
• 37℃培养箱孵育30分钟。
  
• 去染液后用培养基洗涤细胞两次。
  
• 用培养基重悬细胞。
  
• 流式细胞仪或荧光显微镜检测。
  流式细胞仪检测：激发波长505nm，发射波长530nm；
  荧光显微镜观察：滴加100μL细胞悬液于载玻片上观察。